科研服务

噬菌体文库构建与抗体筛选

通用生物提供噬菌体文库构建与抗体筛选服务,可涵盖多种文库类型,能为客户提供基于自有噬菌体抗体文库平台技术制备的多物种单克隆抗体制备服务。可根据客户的需求提供定制服务,并提供灵活有效的筛选服务。

图1 噬菌体展示文库淘选流程

产品详情

步骤 服务描述 服务周期
1 免疫 抗原检测 SDS-PAGE或其它方法检测抗原质量 6-8周
动物免疫(二选一) 5只BalB/C小鼠,3-4次免疫
2只新西兰大白兔,3-4次免疫
2 Fab/ScFv文库构建 cDNA 合成 免疫细胞收集,总RNA提取,反转录合成cDNA。 1周
质粒构建 以上述cDNA为模板, PCR扩增抗体基因片段,并连接至载体。 4周
转化 将已构建好的载体电转化至大肠杆菌菌株。 2周
库容鉴定 (1)以上转化菌株复苏后,梯度稀释,并涂布平板,计算阳性克隆数;
(2)挑选10个阳性单克隆,提取质粒后,进行酶切验证;
(3)通过阳性克隆数和酶切验证的结果,计算抗体库库容。
保证5 x108 clones/library
抗体库生产 通过辅助噬菌粒拯救获得噬菌体展示抗体库。 1周
运输(可选) 低温(干冰)运输。 N/A
3 抗体筛选 抗原检测 SDS-PAGE或其它方法检测抗原质量。 3-4周
抗体筛选 4轮淘洗,抗体亲和力超过 10-7
结合噬菌体的检测(大约40个单克隆) 噬菌体扩增(¥240/克隆) 2周
ELISA检测(¥120/克隆)
噬菌体DNA提取(¥120/克隆)
噬菌体DNA测序(¥120/克隆)
抗体检测(5-10个单克隆) 从以上已测序的结合噬菌体中,挑取5-10株不同序列的噬菌体进行抗体的可溶性表达,并进行ELISA鉴定。 2周
交付 实验报告(测序结果等);抗体基因片段的cDNA。 N/A
4 增值服务 动物加免 增加动物免疫只数 N/A
抗体表达 全抗体Expi293/CHO瞬时表达 2-4周
亲和力测定/排序/表位竞争 运用Biacore T200进行抗体亲和力测定,排序或表位竞争实验 请询价

服务优势

  • 快速筛选得到优质的单克隆抗体
  • 高效、高亲和力
  • 专业的操作以及严格的质量管理
  • 自主基因合成及测序平台

交付标准

  • 鼠源或兔源scFv / Fab文库
  • 实验报告(测序结果等)
  • 抗体基因片段的cDNA

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